油茶籽油掺伪快速鉴别有了新进展

近日，中国农业科学院深圳农业基因组研究所（岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心）王鑫杰课题组分别在《食品科学与技术趋势（Trends in Food Science & Technology）》和《食品化学（Food Chemistry）》发表了题为“NMR spectroscopy combined with chemometrics for quality assessment of common vegetable oils: A review”和“Rapid identification of binary and ternary adulteration in camellia oil by CRISPR/Cas12a assay”的综述论文和研究论文。研究团队聚焦食品质量安全领域高灵敏、便捷化分子检测技术需求，基于RPA-CRISPR/Cas12a体系，成功实现了油茶籽油二元及三元掺伪的快速鉴定。该方法成本可控、设备依赖性低、实操简便，可为复杂食用植物油体系的掺伪鉴别提供新的技术参考。同时，该研究进一步完善了团队在食品真伪溯源、快速检测方向的研究体系，为食品品质管控与安全筛查提供了重要支撑。

原文链接：https://doi.org/10.1016/j.tifs.2025.104889

原文链接：https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2026.149501

油茶籽油（Camellia oleifera Abel.）源自中国南方，因其富含油酸（C18:1，74% - 87%）、多酚、植物甾醇等多种活性成分，已成为最受欢迎的食用植物油之一。由于更高的营养价值和市场售价，油茶籽油掺伪现象频繁发生，不仅造成油茶产业经济损失，而且对特定膳食脂肪酸需求的消费者构成严重潜在健康威胁。传统的色谱-质谱联用技术在指纹图谱分析方面虽然有效，但存在操作复杂、成本高昂且耗时较长的局限性。CRISPR/Cas12a系统为高度灵敏且精准的现场检测提供了新途径。然而，目前尚未见该技术在油茶籽油掺伪检测中的报道。

为解决这些问题，研究团队针对4种常见掺伪油样（大豆油、菜籽油、玉米油和花生油），构建基于CRISPR/Cas12a的油茶籽油掺伪鉴别。该检测体系由DNA提取、RPA扩增和CRISPR/Cas12a反应组成。首先，通过优化后的提取方法可获得浓度与纯度均最优的DNA模板；随后利用RPA技术，在37 ℃等温条件下完成不同油脂样品rbcL基因目标片段的扩增；随后，在crRNA的引导下，快速识别RPA反应产物中的特定核酸序列。在目标rbcL基因存在的情况下，Cas12a蛋白的非特异性切割活性被激活，从而有效地切割溶液中的核酸。当用短波蓝光荧光辐射照射时，阳性样本会发出荧光，可通过荧光计测量。而对于阴性样本，CRISPR-Cas12/gRNA复合物未产生切割活性，导致荧光值较低。

图1基于CRISPR/Cas12a系统的茶油掺伪鉴别原理示意图

针对4种掺伪植物油料rbcL基因设计特异性RPA引物及crRNA后，发现所建立的CRISPR/Cas12a检测体系具有优异的特异性和高灵敏度，对茶油二元、三元掺伪的最低检出限分别可达1%和5%（w/w）。

图2 基于CRISPR/Cas12a检测体系对二元及三元掺伪的特异性和灵敏度分析

为评估所构建RPA-CRISPR/Cas12a方法在油茶籽油真伪鉴别中的实际适用性，利用该方法进一步利用分析了28份样本，其中3份鉴定为纯油茶籽油，其余25份掺假样本（掺伪比例≥5%）可与阴性样本清晰区分。相较于传统气相色谱法（检出限＞10%（w/w），准确率50%），RPA-CRISPR/Cas12a检测方法凭借100%的准确率及更低的检出限（≥5%，w/w），可用于掺伪油样精准快速鉴别。

图3 利用CRISPR/Cas12a与GC-FA方法进行市售油样真伪鉴别

基因组所（大鹏湾实验室）王鑫杰研究员，华南师范大学马晓冬研究员、中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所陈爱亮研究员为共同通讯作者。基因组所助理研究员石婷和华南师范大学硕士生代腾辉为论文共同第一作者。基因组所戴俊彪研究员为本研究做出了重要指导。基因组所硕士生周璟、硕士生张璐璐、博士生崔婕妤，华中农业大学副教授张涛，国家市场监督管理总局重点实验室（食用油质量与安全）武汉食品化妆品检验所高级工程师郦娟，参与了此项研究。

该研究得到国家自然科学基金、中国农业科学院“青年英才”和“优农计划”项目资助、国家市场监督管理总局重点实验室（食用油质量与安全）开放研究基金资助。